Sigma:C2399-1.5KU,間質(zhì)膠原酶VII，cas：C2399-1.5KU

屬性:

質(zhì)量水平:200

無(wú)菌性:sterile-filtered

形式:lyophilized powder

specific activity：≥4 FALGPA units/mg solid

≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

純化方式：chromatography

溶解性：TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C

儲存溫度：?20°C

應用：

膠原酶已用于動(dòng)脈組織的制備，用于晚期糖基化終產(chǎn)物 (AGE) 的研究。該酶還與其他蛋白酶一起使用，用于人體腫瘤、小鼠腎、人腦、肺上皮等多種組織的解聚。在肝臟和腎臟灌注研究、胰腺的消化和非實(shí)質(zhì)肝細胞的分離中也有效。

來(lái)自組織溶梭菌的膠原酶已被用于：

1.誘發(fā)小鼠腦出血（ICH）

2.消化3D膠原蛋白凝膠以進(jìn)行免疫熒光分析

3.引起小鼠局灶性血液外滲和出血

生化/生理作用：

有效地從組織中釋放細胞需要膠原酶和中性蛋白酶的共同作用。每摩爾酶用 4 克原子鈣 (Ca2+) 激活膠原酶。一般認為培養濾液至少含有 7 種不同的蛋白酶，分子量范圍為 68-130 kDa（zui適用 pH：6.3-8.8）。該酶識別序列-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-，其中 X 是最常見(jiàn)的中性氨基酸。

組織溶梭菌包含兩類(lèi)膠原酶。梭菌膠原酶比哺乳動(dòng)物膠原酶更高效。它在膠原三螺旋中的多個(gè)裂解位點(diǎn)進(jìn)行裂解。梭菌膠原酶可參與氣體壞疽中的細菌入侵。

每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巰基乙醇、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。

單位定義：

一個(gè)膠原蛋白消化單元（CDU）從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮氨酸，5小時(shí)，pH7.4,37℃，在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個(gè) FALGPA水解單元每分鐘，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個(gè)中性蛋白酶單元水解酪蛋白，產(chǎn)生顏色和1.0 μmole 酪氨酸每5小時(shí)，pH7.5,37℃下產(chǎn)生的相同。一個(gè)梭菌蛋白酶單元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分鐘水解1.0 μmole BAEE。

制備說(shuō)明

由 VII (C0773) 型制備。在 37℃ 下，將 0.05-0.1 mg 膠原酶溶于 1 mL 含 0.36 mM 氯化鈣 (TESCA) 的 50 mM TES 緩沖液 (pH 7.4) 中，制備貯備液。

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