Sigma:間質(zhì)膠原酶I,C0130-100MG,CAS:9001-12-1

屬性：

質(zhì)量水平：200

形式：essentially salt-free, lyophilized powder

specific activity：≥125 CDU/mg solid

0.25-1.0 FALGPA units/mg solid

分子量：68,000 to 125,000

最佳pH：6.3-8.8

溶解性：TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 1-2 mg/mL at 37 °C

儲存溫度：?20°C

一般描述：

膠原酶是一種可切割被稱(chēng)為膠原蛋白的三螺旋蛋白的蛋白酶。存在有三種類(lèi)型的組織膠原酶，而它們都屬于基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）家族。從溶組織梭菌中獲得的膠原酶具有非常強的活性，因為它可在低至4-10℃的溫度下從兩端對膠原蛋白進(jìn)行消化。粗膠原酶混合物含有兩種主要的酶類(lèi)型，即膠原酶和梭菌蛋白酶。

應用

來(lái)自溶組織梭菌的膠原酶在生物學(xué)研究中具有廣泛的用途，它可用于制備分離的細胞懸浮液。該產(chǎn)品適用于人類(lèi)腫瘤、小鼠腎臟、人類(lèi)成人和胎兒腦、肺和許多其他上皮組織的解聚。它還被證明可有效用于肝臟和腎臟灌注研究、胰腺消化、非實(shí)質(zhì)大鼠肝細胞的分離以及肝細胞的制備。 膠原酶已用于研究晚期糖基化終產(chǎn)物所需的動(dòng)脈組織的制備。該酶已經(jīng)測試可以約1 mg/mL的濃度釋放肝細胞。用于消化的濃度范圍是0.1至5 mg/mL。

包裝

100, 500 mg in poly bottle

1, 5 g in poly bottle

生化/生理作用

該膠原酶產(chǎn)物是由溶組織梭菌所分泌的酶混合物組成，且不同的產(chǎn)物可通過(guò)在分泌酶中所發(fā)現的10-18種化合物的比例而進(jìn)行區分。 主要的成分是兩種膠原酶、梭菌蛋白酶和一種中性蛋白酶。 這些酶的協(xié)同作用可降解膠原蛋白及其他細胞內物質(zhì)。膠原酶和中性蛋白酶的作用對于從組織中有效釋放細胞是必需的。 不同類(lèi)型的膠原蛋白是膠原酶的天然底物。

每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巰基乙醇、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。

注意

根據所提供的信息，該產(chǎn)品在-20°C下可穩定保存一年。 在37℃、50℃和-20℃下FALGPA或蛋白酶的活性在30天內不會(huì )有損失。如果進(jìn)行分裝（10mg / mL）并快速凍存在-20℃，則粗膠原酶的溶液是可以穩定的。進(jìn)一步的反復凍融會(huì )損壞溶液。 該產(chǎn)品在置于冰上時(shí)可保持100%活性超過(guò)7小時(shí)。

單位定義

一個(gè)膠原蛋白消化單元（CDU）從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮氨酸，5小時(shí)，pH7.4,37℃，在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個(gè) FALGPA水解單元每分鐘，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個(gè)中性蛋白酶單元水解酪蛋白，產(chǎn)生顏色和1.0 μmole 酪氨酸每5小時(shí)，pH7.5,37℃下產(chǎn)生的相同。一個(gè)梭菌蛋白酶單元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分鐘水解1.0 μmole BAEE。

制備說(shuō)明

該產(chǎn)品相當于最初的40％硫酸銨部分 Mandl, I., et al.,J. Clin.Invest., 32, 1323 (1953).溶液通常是在TESCA緩沖液（含有50mM TES、0.36mM氯化鈣，37℃時(shí)pH 7.4）中按1-2 mg/mL進(jìn)行制備。

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