Sigma試劑:胰蛋白酶-EDTA，T4049-100ML

屬性：

生物來(lái)源：Porcine

質(zhì)量水平：400

無(wú)菌性：sterile-filtered

產(chǎn)品線(xiàn)：BioReagent

形式：solution

分子量：23.4 kDa

濃度：0.25%

應用：cell culture | mammalian: suitable

雜質(zhì)：Porcine parvovirus, none detected (9 CFR)

pH值（酸堿度）：7.0-7.6

運輸：dry ice

儲存溫度：?20°C

應用：

胰蛋白酶-EDTA溶液已用于：

在高濃度樣品的相對細胞頻率測定期間，將在補充了10%胎牛血清的RPMI 1640中培養的HT29人結直腸癌細胞進(jìn)行分離。

胰蛋白酶消化瞬時(shí)轉染的人胚腎tcA-201細胞系

在細胞培養期間酶促釋放粘附于支架的小鼠成纖維細胞（L929細胞系），以評估幾種改性處理對聚（L/D）丙交酯96/4非織造支架和纖維的影響。

該產(chǎn)品的常見(jiàn)用途在于將貼壁細胞從培養基表面移除。 將細胞從基底上分離所需的胰蛋白酶濃度主要依賴(lài)于細胞類(lèi)型和培養基已使用的時(shí)間。

生化/生理作用：

胰蛋白酶可切割賴(lài)氨酸和精氨酸殘基的C末端肽段。 如果酸性殘基位于切割位點(diǎn)的任意一側，則該反應的水解速度減慢，并且如果脯氨酸殘基位于切割位點(diǎn)的羧基側，則水解停止。 胰蛋白酶活性的最佳pH條件為7-9。 胰蛋白酶還可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺鍵。 將EDTA添加到胰蛋白酶溶液中作為螯合劑，用于中和鈣離子和鎂離子以防止其抑制胰蛋白酶活性。 去除這些離子會(huì )增加酶活性。

絲氨酸蛋白酶抑制劑（包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等）會(huì )抑制胰蛋白酶。

組分：

胰蛋白酶是由223個(gè)氨基酸殘基的單鏈多肽所組成，通過(guò)從胰蛋白酶原在Lys - lle肽鍵處被切割去除N末端六肽而產(chǎn)生。 氨基酸序列通過(guò)6個(gè)二硫鍵交聯(lián)。 這是天然形式的胰蛋白酶——β-胰蛋白酶。 β-胰蛋白酶可以自溶，在Lys-Ser殘基處斷裂，產(chǎn)生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是絲氨酸蛋白酶家族的成員。

注意：

本品應置于-10至-40°C環(huán)境冷凍儲存。避免反復凍融。

制備說(shuō)明：

該產(chǎn)品中含有酚紅。 由于該產(chǎn)品通過(guò)干冰進(jìn)行運輸，所以在包裝中會(huì )有顯著(zhù)的二氧化碳累積。 這些CO2可能會(huì )進(jìn)入到溶液并略微降低pH，從而產(chǎn)生橙色而非淡粉色的顏色。 這種橙色的溶液依然適合使用，或者也可利用氫氧化鈉對pH進(jìn)行調整。 用過(guò)高濃度的胰蛋白酶對細胞進(jìn)行過(guò)長(cháng)時(shí)間的孵育可造成細胞膜的損傷并殺死細胞。 將胰蛋白酶溶解或將其從濃縮液進(jìn)行稀釋?xiě)捎貌缓?/span>Ca2+或Mg2+的緩沖鹽溶液。

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