Sigma：蛋白酶 K，P6556-25MG

屬性：

形式：lyophilized powder

質(zhì)量水平：300

specific activity：≥30 units/mg protein

分子量：28.93 kDa

溶解性：H2O: soluble 1 mg/mL, clear, colorless

異質(zhì)活性：Dnase ≤30 Kunitz units/mg solid
RNase ≤0.003 Kunitz units/mg solid

運輸：wet ice

儲存溫度：?20°C

應用：

P6556產(chǎn)品為凍干粉形式。P6556產(chǎn)品已可用于分解人晶狀體蛋白[1]。蛋白酶K消化的蛋白酶印跡可以揭示蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)表面的相互作用。[2]Sigma的該酶已用于雞胚的預雜交。[3]它還被用來(lái)富集PrPSc，一種存在于羊、倉鼠和老鼠癢病樣本中的朊病毒蛋白。[4]

在分離DNA和RNA的過(guò)程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除內毒素結合的陽(yáng)離子蛋白，如溶jun酶和核糖核酸酶A。
據報道，其可用于分離肝、酵母和綠豆線(xiàn)粒體
用于測定酶在細胞膜上的定位
用于石蠟包埋組織切片的處理，暴露用于抗體標記的抗原結合位點(diǎn)。
用于可傳播海綿狀腦病(TSE)研究中朊病毒腦組織樣本蛋白的消化。

在分離DNA和RNA的過(guò)程中，蛋白酶K對核酸酶的蛋白水解失活起作用。
它被用于去除內毒素結合的陽(yáng)離子蛋白，如溶jun酶和核糖核酸酶A。
它可用于分離肝、酵母和綠豆線(xiàn)粒體
，并用于測定酶在細胞膜上的定位
用于石蠟包埋組織切片的處理，暴露用于抗體標記的抗原結合位點(diǎn)，并
用于可傳播海綿狀腦病(TSE)研究中朊病毒腦組織樣本蛋白的消化。 P6556產(chǎn)品為凍干粉形式。 P6556產(chǎn)品已可用于分解人晶狀體蛋白[1]。

生化/生理作用：

蛋白酶K具有廣泛的特異性，即使在天然狀態(tài)下也能降解許多蛋白質(zhì)。它主要裂解脂肪族和芳香族氨基酸羧基附近的含有封閉α-氨基的肽鍵。[4][5][6]最佳pH值在7.5-9.0之間，等電點(diǎn)為8.9，其活性激活需要[4] Ca2+ (1-5 mM)。蛋白酶K可被二異丙基氟磷酸(DFIP)和苯甲huang酰氟(PMSF)抑制。[5]

蛋白酶K是一種穩定且具有高活性的絲an酸蛋白酶。晶體和分子結構研究證據表明該酶屬于枯草素家族，具有活性位點(diǎn)催化三聯(lián)體(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列廣泛的環(huán)境中均穩定：pH，緩沖鹽，去污劑（SDS）以及溫度。 在0.1-0.5% SDS存在的情況下，蛋白酶K可保持活性，在不損害分離DNA完整性的前提下，可以消化DNA制劑中的多種蛋白質(zhì)和核酸酶。

單位定義：

一單位在37°C、pH 7.5條件下每分鐘可水解尿素變性血紅蛋白而產(chǎn)生相當于1.0μmole(181 μg)的酪an酸顯色（福林酚試劑顯色）。

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